DNaas I (Rnaasivaba) (2u/ul)
Kassi nr: HC4007B
DNaas I on endonukleaas, mis suudab seedida ühe- või kaheahelalist DNA-d.See võib hüdrolüüsida fosfodiestersidemeid, saades mono- ja oligodeoksünukleotiide, mis sisaldavad 5'-fosfaatrühma ja 3'-OH rühma.DNaas I optimaalne töö pH-vahemik on 7-8.DNaas I aktiivsus sõltub Ca2+ja seda saab aktiveerida kahevalentsed metalliioonid nagu CO2, Mn2+, Zn2+jne. Mg juuresolekul2+, DNaas I võib juhuslikult lõhustada iga kaheahelalise DNA saiti;Kuigi Mn juuresolekul2+, võib DNaas I lõhustada DNA kaheahelalise samast kohast, moodustades tömbid või kleepuvad otsad, mille väljaulatuvad 1-2 nukleotiidid.Seda saab kasutada erinevate RNA proovide töötlemiseks.
Komponendid
Nimi | 1KU | 5KU |
Rekombinantne DNaasI (RNaasivaba) | 500 μL | 5 × 500 μL |
DNAase I reaktsioonipuhver (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Säilitustingimused
Seda toodet tuleb hoida temperatuuril -25–15 ℃ 2 aastat.Vältige korduvat külmutamist-sulatamist.
Juhised
Rakendatakse RNA proovidest DNA eemaldamisel ainult viitamiseks.
1. Kasutage järgmise reaktsioonisüsteemi ettevalmistamiseks RNaasi-vabu tsentrifuugitorusid ja pipetiotsikuid:
Komponendid | Maht (μL) |
DNAase I reaktsioonipuhver (10×) | 1 |
Rekombinantne DNA (RNaasivaba) | 1 |
RNA | X |
RNaasivaba ddH2O | Kuni 10 |
2. Reaktsioonitingimused on järgmised: 37 ℃ 15-30 minuti pärast lisage lõppkontsentratsiooniks 2,5 mM EDTA lahust ja segage hästi, seejärel 65 ℃ 10 minutit.Töödeldud matriitsi saab kasutada järgnevateks RT-PCR või RT-qPCR katseteks jne.
Märkmed
1. DNaas l on tundlik füüsilise denaturatsiooni suhtes;Segamisel keerake katseklaasi ettevaatlikult ümber jaloksutage hästi, ärge raputage tugevalt.
2. Ensüümi tuleks hoida jääkastis või jäävannis, kui seda kasutatakse, ja kohe pärast kasutamist temperatuuril -20 ℃.
3. See toode on ainult teaduslikuks kasutamiseks.
4. Kasutage oma ohutuse tagamiseks laborikitleid ja ühekordseid kinnasid.