Ultra Nuclease GMP-klassi
Kassi nr: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade ekspresseeritakse ja puhastatakse Escherichia colis (E. coli) geneetiliselt muundatud ja valmistatud GMP keskkondades.See võib teadusuuringutes vähendada raku supernatandi ja rakulüsaadi viskoossust, suurendada valgu puhastamise efektiivsust ja tõhustada valgu funktsionaalseid uuringuid.Toode võib ka vähendada peremeesnukleiinhappejääke pg-klassini, parandades selliste rakenduste bioloogiliste toodete toimivust ja ohutust, nagu viiruse puhastamine, vaktsiinide tootmine ja valkude/polüsahhariidide ravimite tootmine.Lisaks saab toodet kasutada ka inimese perifeerse vere mononukleaarsete rakkude (PBMC) kokkukleepumise vältimiseks rakuteraapias ja vaktsiini väljatöötamisel.
UltraNuclease valmistatakse steriliseeritud reagendi kujul, elueeritakse puhvris (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glütseriin), mis on värvitu läbipaistev vedelik.See toode on toodetud GMP protsessi nõuete kohaselt ja seda pakutakse vedelal kujul.
Komponendid
UltraNuclease GMP-klassi (250 U/μL)
Säilitamistingimused
Toode tarnitakse kuiva jääga ja seda saab säilitada temperatuuril -25℃~-15°C kaks aastat.
Kui toode on avatud ja seda on hoitud temperatuuril 4℃ üle nädala, soovitame filtreeridatoode mikroobse saastumise vältimiseks.
Tehnilised andmed
| Väljenduse host | UltraNuclease geeniga rekombinantne E. coli |
| Molekulmass | 26,5 kDa |
| elektriline punkt | 6.85 |
| Puhtus | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Salvestuspuhver | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glütseriini |
|
Ühiku määratlus | Ühe aktiivsusühiku (U) määratlus on ensüümi kogus, mida kasutataksemuutke ΔA260 neeldumisväärtust 1,0 võrra 30 minutiga 2,625 mlreaktsioonisüsteem temperatuuril 37 ℃ pH-ga 8,0 (võrdne täieliku seedimisega37 μg lõhe sperma DNA oligonukleotiidideks). |
Juhised
1. Näidis Kollektsioon
Kleepuvad rakud: eemaldage sööde, peske rakke PBS-ga ja eemaldage supernatant.
Suspensioonirakud: koguge rakud tsentrifuugimisega, peske rakke PBS-ga, tsentrifuugige 6000 juuresrpm 10 min, koguge pellet kokku.
Escherichia coli: koguge bakterid tsentrifuugimisega, peske üks kord PBS-ga, tsentrifuugige 8000 juuresrpm 5 minutit ja koguge pellet kokku.
2. Proovitöötlus
Töödelge kogutud rakusademeid lüüsipuhvriga massi (g) ja mahu (mL) suhtega 1: (10-20) või mehaaniliste või keemiliste meetoditega jääl või toatemperatuuril (1 g rakusadet sisaldab umbes
109 rakku).
3. Ensüümravi
Lisage reaktsioonisüsteemile 1-5 mM MgCl ja reguleerige pH väärtuseni 8-9.
Lisage UltraNuclease vahekorras 250 ühikut, et seedida 1 g rakusademeid, inkubeerida temperatuuril 37 ℃ üle 30 minuti.Palun vaadake vormi "Soovitatav reaktsiooniaeg", et validaravi kestus.
4. Supernatant Kollektsioon
Tsentrifuugige kiirusel 12 000 p/min 30 minutit ja koguge supernatant.
Märkus: kui lahus on happeline või aluseline või sisaldab suures kontsentratsioonis soola, pesuaineid võidenatureerivate ainete puhul suurendage ensüümi annust või pikendage vastavalt raviaega.
Soovitatavad reaktsioonitingimusedons
| Parameeter | Optimaalne seisukord | Tõhus konditsioneer |
| Mg²+kontsentratsioon | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatuur | 37℃ | 0-42 ℃ |
| DTT kontsentratsioon | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanooli kontsentratsioon | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalentsete katioonide kontsentratsioon | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfaat-loni kontsentratsioon | 0-10 mM | 0-100 mM |
Soovitatav Reaktsioon Aeg (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease kogus (lõplik kontsentratsioon) | Reaktsiooniaeg |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Märkused:
Palun kandke oma tervise ja ohutuse tagamiseks vajalikke isikukaitsevahendeid, näiteks laborikittlit ja kindaid!
