Multiplex One Step RT-qPCR eelsegu
Kirjeldus
Kassi nr: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix on multipleksne kvantitatiivne PCR komplekt, mis põhineb matriitsina RNA-l.Eksperimendis viiakse pöördtranskriptsioon ja kvantitatiivne PCR läbi samas reaktsioonituubis, mis lihtsustab katsetoimingut ja vähendab saastumise ohtu.Puhvri ja ensüümide segu ainulaadset disaini saab kasutada üheastmelises lüofiliseeritud süsteemis.Komplektis kasutatakse kuumakindlat pöördtranskriptaasi esimese ahela cDNA tõhusaks sünteesiks, kasutades kvantitatiivseks amplifikatsiooniks hotstart Taq DNA polümeraasi.See sisaldab optimeeritud reaktsioonipuhvrit, ensüümide segu jne ning lisati tegurid, mis tõhusalt inhibeerivad mittespetsiifilist PCR amplifikatsiooni ja suurendavad mitme qPCR reaktsiooni amplifikatsiooni efektiivsust, võimaldades mitmekordset fluorestsentsi kvantitatiivset amplifikatsiooni, tagades samal ajal praimerite amplifikatsiooni efektiivsuse.
Komponendid
| Nimi |
| 1. Lyo-puhver |
| 2. Lyo-ensüümide segu |
| 3. Lyo kaitsevahend |
Transpordi seisukordioon
V: Lyo-puhver ja kaitseaine: -25 ~ -15 ℃, säilivusaeg on 1 aasta.
B: Lyo-ensüümi segu, 2-8 ℃, säilivusaeg on 6 kuud.
Kasutusjuhend
1. Reaktsioonisüsteem (Võtke näiteks 25 μL)
| Komponendid | Maht (μL) | Lõplik kontsentratsioon |
| Lyo-puhver | 6 | 1* |
| Lyo-ensüümide segu | 1 | - |
| Lyo-kaitsevahend | 8 | - |
| Praimeri segu (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Sondi segu (10 μM) | 0.5 | 0,05-0,5 uM |
| RNA mall | 5 | - |
| DEPC H2O | Kuni 25 | - |
2. Optimeeritud jalgrattaprotokoll
1) Standardne jalgrattaprotokoll
| Reaktsiooni staadium | Temperatuur | Aeg | Tsükkel | |
| 1 | Pöördtranskriptsioon | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Esialgne denaturatsioon | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifitseerimisreaktsioon | 95°C | 15 sek | 45 tsüklit |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Kiire jalgrattasõidu protokoll
|
| Reaktsiooni staadium | Temperatuur | Aeg | Tsükkel |
| 1 | Pöördtranskriptsioon | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Esialgne denaturatsioon | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifitseerimisreaktsioon | 95°C | 1 s |
45 tsüklit |
| 60°Cb | 13 sekc |
Märge:
a) Tagurpidi transkriptsioon: Temperatuuri saab valida 42°C või 50°C 10-15 minutiks.
b) Amplifitseerimisreaktsioon: Temperatuuri reguleeritakse vastavalt projekteeritud praimerite Tm väärtusele.
c)Fluorestsents signaal omandamine: Palun määrake katseprotseduur vastavalt dokumendi nõueteleinstrumendi käsiraamat.
Tehniline teave/spetsifikatsioonid
| Kuum algus | Sisseehitatud kuumkäivitus |
| Tuvastamismeetod | Praimer-sondi tuvastamine |
| PCR meetod | Üheastmeline RT-qPCR |
| Proovi tüüp | RNA |
Märkmed
1. See toode on ainult teaduslikuks kasutamiseks.
2. Palun kandke oma tervise ja ohutuse tagamiseks vajalikke isikukaitsevahendeid, näiteks laborikittlit ja kindaid!
