Hotstart Taq DNA polümeraas (5 u/ul)
Taq DNA polümeraas on kuumkäivitusega DNA polümeraas, millel on topeltblokeerimine topeltantikehadega. See toode mitte ainult ei blokeeri Taq DNA polümeraasi 5′→3′ polümeraasi aktiivsust, vaid blokeerib ka 5′→3′eksonukleaasi aktiivsust.30-sekundiline kuumutamine denatureerimiseelsel temperatuuril võib antikeha täielikult inaktiveerida ja vabastada DNA polümeraasi aktiivsuse ja eksonukleaasi aktiivsuse.Topeltblokeerimisomadused ei saa mitte ainult tõhusalt ära hoida mittespetsiifilist amplifikatsiooni, mis on põhjustatud mittevastavusest või praimeri dimeerist, vaid ka tõhusalt pärssida sondi lagunemisest põhjustatud fluorestsentssignaali vähenemist, et muuta in vitro tuvastamisreaktiiv transportimise või toas kasutamise ajal stabiilsemaks. temperatuuri.
Komponendid
| Komponent | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
| Taq DNA polümeraas(5 U/μL) | 50 μL | 200 μL | 2 ml | 5 ml |
Ladustamise seisukord
Toode tarnitakse kuiva jääga ja seda saab säilitada temperatuuril -25°C~-15°C 2 aastat.
Tehnilised andmed
| Polümeraas | Taq DNA polümeraas |
| Puhtus | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
| Kuum algus | Sisseehitatud kuumkäivitus |
| Reaktsiooni kiirus | Standard |
| Eksonukleaasi aktiivsus | 5′→3′ |
Juhised
Reaktsiooni seadistamine
| Komponendid | Helitugevus (μL) | Lõplik kontsentratsioon |
| 2 × puhvera | 25 | 1× |
| Krundi/sondi segub | × | 0,1 μmol/L-0,5 μmol/L |
| Hotstart Taq Polymerase (5U/μL) | 1.2 | 0,12 U/μL |
| DNA mallc | × | 0,1-100 ng |
| ddH2O | Kuni 50 | - |
Märkused:
1) Vastavalt konkreetsele eksperimentaalsele rakendusele on vaja valmistada vastav reaktsioonipuhver.
2) DNA kogus ja sondide või praimerite kontsentratsioon on soovitatavad kontsentratsioonid.Optimaalset kontsentratsiooni saab reguleerida vastavalt konkreetsetele katsetingimustele.
Termilise rattasõidu protokoll
| Samm | Temperatuur(°C) | Aeg | Tsüklid |
| Eeldenatureerimine | 95 ℃ | 5 minutit | 1 |
| Denatureerimine | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Lõõmutamine / pikendamine | 60 ℃a | 30 sekb |
Märkused:
1) Reaktsiooni temperatuuri reguleeritakse vastavalt kavandatud praimerite Tm väärtusele.
2) Erinevad qPCR-instrumendid vajavad erinevat fluorestsentssignaali omandamise aega, palun määrake vastavalt lühimale ajalimiidile.
Märkmed
Palun kandke oma tervise ja ohutuse tagamiseks vajalikke isikukaitsevahendeid, näiteks laborikittlit ja kindaid!
