2 × PCR Master Mix (ilma värvaineta)
PCR Master Mix on omamoodi tavaline PCR eelsegatud lahus, mis on kasutusvalmis, sealhulgas Taq DNA polümeraas, dNTP mix MgCl2 ja optimeeritud puhver.Reaktsiooni käigus saab amplifitseerimiseks lisada ainult praimerit ja matriitsi, mis lihtsustab oluliselt katse toimimisetappe.See toode sisaldab suurepäraseid stabilisaatoreid ja seda saab säilitada 3 kuud temperatuuril 4 ℃.PCR-i produktil on 3'-dA eend ja seda saab hõlpsasti T-vektorisse kloonida.
Säilitamistingimused
Toodet tuleb hoida temperatuuril -25 ℃ ~ -15 ℃ kaks aastat.
Tehnilised andmed
| Truudus (vs. Taq) | 1× |
| Kuum algus | No |
| Üleulatuvus | 3′-A |
| Polümeraas | Taq DNA polümeraas |
| Reaktsioonivorming | SuperMix või Master Mix |
| Reaktsiooni kiirus | Standard |
| Toote tüüp | PCR Master Mix (2×) |
Juhised
1.Reaktsioonisüsteem
| Komponendid | Suurus (μL) |
| Malli DNA | Sobivad |
| Praimer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Praimer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50-ni |
2.Võimendusprotokoll
| Tsükli sammud | Temperatuur (°C) | Aeg | Tsüklid |
| Eeldenatureerimine | 94 ℃ | 5 minutit | 1 |
| Denatureerimine | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Lõõmutamine | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Laiendus | 72 ℃ | 30-60sek/kb | |
| Lõplik laiendus | 72 ℃ | 10 minutit | 1 |
Märkused:
1) Mallide kasutamine: 50-200 ng genoomset DNA-d;0,1-10 ng plasmiidset DNA-d.
2) Mg2+kontsentratsioon: see toode sisaldab 3 mM MgCl2, mis sobib enamiku PCR reaktsioonide jaoks.
3) Lõõmutustemperatuur: vaadake praimerite teoreetilist Tm väärtust.Lõõmutamistemperatuuri saab seada 2-5 ℃ madalamale kui praimeri teoreetiline väärtus.
4) Pikenduse aeg: molekulaarseks tuvastamiseks on soovitatav 30 sek/kb.Geenide kloonimiseks 60s/kb on soovitatav.
Märkmed
1.Oma ohutuse ja tervise huvides kandke töötamiseks laborikitlit ja ühekordseid kindaid.
2.Ainult teaduslikuks kasutamiseks!
