Viiruse DNA/RNA ekstraheerimise komplekt
See komplekt sobib kõrge puhtusastmega viiruse DNA/RNA kiireks ekstraheerimiseks proovidest, nagu nina-neelu tampoonid, keskkonnast võetud tampoonid, rakukultuuri supernatandid ja koehomogenaadi supernatandid.Komplekt põhineb ränidioksiidi membraanipuhastustehnoloogial, mis välistab vajaduse kasutada fenool/kloroformi orgaanilisi lahusteid või aeganõudvat alkoholisadestamist kõrge kvaliteediga viiruse DNA/RNA ekstraheerimiseks.Saadud nukleiinhapped on lisanditeta ja valmis kasutamiseks allavoolu katsetes, nagu pöördtranskriptsioon, PCR, RT-PCR, reaalajas PCR, järgmise põlvkonna sekveneerimine (NGS) ja Northern blot.
Säilitustingimused
Hoida temperatuuril 15 ~ 25 ℃ ja transportida toatemperatuuril
Komponendid
| Komponendid | 100RXNS |
| Puhver VL | 50 ml |
| Puhver RW | 120 ml |
| RNaasivaba ddH2O | 6 ml |
| FastPure RNA veerud | 100 |
| Kogumistuubid (2 ml) | 100 |
| RNaasivabad kogumistuubid (1,5 ml) | 100 |
Puhver VL:Looge keskkond lüüsiks ja sidumiseks.
Puhver RW:Eemaldage jääkvalgud ja muud lisandid.
RNaasivaba ddH2O:Elueerige DNA/RNA membraanilt spinkolonnis.
FastPure RNA veerud:Täpsemalt adsorbeerige DNA/RNA.
Kogumistuubid 2 ml:Filtraat koguda.
RNaasivabad kogumistuubid 1,5 ml:Koguge DNA/RNA.
Rakendused
Nasofarüngeaalsed tampoonid, keskkonnast võetud tampoonid, rakukultuuri supernatandid ja koehomogenaadi supernatandid.
Isevalmistatud Materials
RNaasivabad pipetiotsad, 1,5 ml RNaasivabad tsentrifuugituubid, tsentrifuug, keerismikser ja pipetid.
Katseprotsess
Tehke kõik järgmised toimingud bioohutuskapis.
1. Lisage 200 μl proovi RNaasi-vabasse tsentrifuugi katsutisse (ebapiisava proovi korral täiendage PBS-iga või 0,9% NaCl-ga), lisage 500 μl puhvrit VL, segage hästi vorteksiga 15–30 sekundit ja tsentrifuugige. korraks, et koguda segu toru põhja.
2. Asetage FastPure RNA kolonnid 2 ml kogumistuubidesse.Viige segu 1. etapist üle FastPure RNA kolonnidesse, tsentrifuugige kiirusel 12 000 p/min (13 400 × g) 1 minut ja visake filtraat ära.
3. Lisage FastPure RNA kolonnidele 600 μl puhvrit RW, tsentrifuugige kiirusel 12 000 p/min (13 400 × g) 30 sekundit ja visake filtraat ära.
4. Korrake 3. sammu.
5. Tsentrifuugige tühja kolonni kiirusel 12 000 p/min (13 400 × g) 2 minutit.
6. Viige FastPure RNA kolonnid ettevaatlikult uutesse 1,5 ml RNaasivabadesse kogumistuubidesse (komplektis kaasas) ja lisage kolonni puudutamata membraani keskele 30–50 μl RNaasivaba ddH2O.Laske seista toatemperatuuril 1 minut ja tsentrifuugige kiirusel 12 000 p/min (13 400 × g) 1 minut.
7. Visake ära FastPure RNA kolonnid.DNA/RNA-d saab kasutada otse järgnevateks analüüsideks või säilitada temperatuuril -30-15 °C lühiajaliselt või -85-65 °C juures pikemat aega.
Märkmed
Ainult teaduslikuks kasutamiseks.Mitte kasutada diagnostilistes protseduurides.
1. Tasakaalustage proovid eelnevalt toatemperatuurini.
2. Viirused on väga nakkavad.Veenduge, et enne katset oleks võetud kõik vajalikud ettevaatusabinõud.
3. Vältige proovi korduvat külmutamist ja sulatamist, kuna see võib viia ekstraheeritud viiruse DNA/RNA lagunemiseni või vähenemiseni.
4. Isevalmistatud seadmed hõlmavad RNaasi-vabasid pipetiotsikuid, 1,5 ml RNaasi-vabu tsentrifuugitorusid, tsentrifuugi, keerismikserit ja pipette.
5. Komplekti kasutamisel kandke laborikitlit, ühekordselt kasutatavaid latekskindaid ja ühekordselt kasutatavat maski ning kasutage RNaasi-vabu kulumaterjale, et minimeerida RNaasi saastumise ohtu.
6. Kui pole teisiti määratud, tehke kõik toimingud toatemperatuuril.
Mehhanism ja töövoog
