Desoksüribonukleaas I (Dnaas I)
Kirjeldus
DNaas I (desoksüribonukleaas I) on endodesoksüribonukleaas, mis suudab seedida ühe- või kaheahelalist DNA-d.See tunneb ära ja lõikab fosfodiestersidemeid, et toota monodeoksünukleotiide või ühe- või kaheahelalisi oligodeoksünukleotiide, mille 5'-otsas on fosfaatrühmad ja 3'-otsas hüdroksüülrühmad.DNaas I aktiivsus sõltub Ca 2+ -st ja seda võivad aktiveerida kahevalentsed metalliioonid nagu Mn 2+ ja Zn 2+.5 mM Ca 2+ kaitseb ensüümi hüdrolüüsi eest.Mg 2+ juuresolekul võib ensüüm juhuslikult ära tunda ja lõhustada mis tahes saidi mis tahes DNA ahelas.Mn 2+ juuresolekul saab DNA kaksikahelaid samaaegselt ära tunda ja peaaegu samast kohast lõhustada, moodustades lamedate otstega DNA fragmente või kleepuva otsaga DNA fragmente, mille eenduvad 1-2 nukleotiidi.
Keemiline struktuur
Ühiku määratlus
Üks ühik on defineeritud kui ensüümi kogus, mis lagundab täielikult 1 µg pBR322 DNA-d 10 minutiga temperatuuril 37 °C.
Spetsifikatsioon
Testitavad esemed | Tehnilised andmed |
Puhtus (SDS-PAGE) | ≥ 95% |
Rnase aktiivsus | Degradeerumine puudub |
gDNA saastumine | ≤ 1 koopia/μL |
Transport ja ladustamine
Transport:Tarnitakse temperatuuril alla 0 °C
Hoiustamine:Hoida temperatuuril -25-15°C
Soovitatav kordustesti eluiga:2 aastat