BsaI restriktsiooni endonukleaas
Kirjeldus
Bsal restriktsiooniensüüm on II tüüpi restriktsiooniendonukleaas, mis on tuletatud E. coli poolt ekspresseeritud Bacillus sphaericus'e BspQI geeni poolt kodeeritud rekombinantsest valgust.Restriktsiooniendonukleaase kasutatakse laialdaselt geenide kaardistamisel, kloonimisel ja muudes valdkondades.See ensüüm lõikab DNA kiiresti tõhusaks geeni lineariseerimiseks Bsal, IIs restriktsiooni endonukleaasi restriktsiooni endonukleaas, pärineb rekombinantsest E. coli tüvest, mis kannab Bacillus stearothermophilus'e kloonitud ja modifitseeritud Bsal geeni.millel on sama spetsiifilisus kui natiivsetel ensüümidel ja vähenenud tähtede aktiivsus.Selle äratundmisjärjestus ja lõhustamiskohad on järgmised:
5'·······GTCTC(N)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)·······5'
Keemiline struktuur
Toote omadused
• Restriktsiooniendonukleaasil on kõrge ensümaatiline aktiivsus ja see viib seedimisreaktsiooni kiiresti lõpule.
• Madal mittespetsiifiline endonukleaasi aktiivsus, et tagada täpne "skalpelliga" lõikamine.
• Puudub BSA süsteem, mis vähendab soojusallika saastet.
Spetsifikatsioon
Testitavad esemed | Tehnilised andmed |
Ensüümi aktiivsus | 20 U/µL |
Puhtus (SDS-PAGE) | ≥95% |
Rnase | Ühtegi ei tuvastatud |
Mittespetsiifiline DNA aktiivsus | Ei tuvastatud |
Tähtede tegevus | Ei tuvastatud |
Ligeerimine ja ümberlõikamine | Pärast seedimist saab DNA fragmente ligeerida.Ja neid ligeeritud fragmente saab Bsal-iga uuesti lõigata. |
Endotoksiinid (LAL-test) | ≤10 EU/mg |
E. Coli DNA | ≤1 koopia/2U |
Kvaliteedi kontroll
Puhtus ≥ 95%, DNaasi puudub, RNaasi aktiivsus, peremees-DNA jääk ≤ 100 pg/mg, peremeesvalgu jääk ≤ -50 ppm, endotoksiini jääk ≤ 10EU/mg, proteaasi aktiivsus puudub, steriilne, mükoplasmavaba
Rakendus
Seedige plasmiid, et valmistada polü- (A/T/C/G) lõpust lineariseeritud DNA fragment;
Enne in vitro transkriptsiooni lineariseerige plasmiidi matriits;
Piirangud;
Ühiku määratlus
Üks ühik on defineeritud kui ensüümi kogus, mis on vajalik 1 µg sisekontrolli DNA seedimiseks 1 tunni jooksul temperatuuril 37 °C reaktsiooni kogumahus 50 µl.
Transport ja ladustamine
Transport:Tarnitakse alla -15°C
Hoiustamine:Hoida temperatuuril -25-15°C
Soovitatav kordustesti eluiga:1 aasta