Leeliseline fosfataas (ALP)
Kirjeldus
Aluseline fosfataas pärineb rekombinantsest E. coli tüvest, mis kannab TAB5 geeni.Ensüüm katalüüsib DNA ja RNA fosfomonoestrite 5' ja 3' otste defosforüülimist.Samuti hüdrolüüsib see riboosi, aga ka desoksüribonukleosiidtrifosfaate (NTP-sid ja dNTP-sid).TAB5 Leeliseline fosfataas toimib 5" väljaulatuvatele, 5" süvistatud ja tömpidele otstele.Fosfataasi saab kasutada paljudes molekulaarbioloogia rakendustes, nagu kloonimine või sondi otste märgistamine, et eemaldada DNA või RNA fosforüülitud otsad.Kloonimiskatsetes takistab defosforüülimine lineariseeritud plasmiidse DNA iseligeerumist.Samuti võib see lagundada PCR-reaktsioonides inkorporeerimata dNTP-sid, et valmistada DNA sekveneerimiseks matriitsi.Ensüüm inaktiveeritakse täielikult ja pöördumatult, kuumutades 70 °C juures 5 minutit, muutes seeläbi fosfataasi eemaldamise enne ligeerimist või lõppmärgistamist mittevajalikuks.
Keemiline struktuur
Spetsifikatsioon
| Testitavad esemed | Tehnilised andmed |
| Ensüümi aktiivsus | 5U/μL |
| Puhtus | ≥ 95% |
| Endonukleaasi aktiivsus | Ei ole tuvastatav |
| Eksonukleaasi aktiivsus | Ei ole tuvastatav |
| Hüüdmise tegevus | Ei ole tuvastatav |
| RNaasi aktiivsus | Ei ole tuvastatav |
| E. coli DNA | ≤1 koopia/5U |
| Endotoksiin | LAL-test, ≤ 10EU/mg |
Transport ja ladustamine
Transport:Jääpakid
Hoiustamine:Hoida temperatuuril -25-15°C (vältige korduvat külmutamist ja sulatamist)
Soovitatav kordustesti eluiga:2 aastat
