2 × PCR Super Mix (värviga)
2× PCR Master Mix sisaldab Taq DNA polümeraasi, dNTP-sid ja muid PCR-i jaoks vajalikke komponente.Master Mix on meie kohandatud stabilisaatoritega stabiilne 3 kuud temperatuuril 4 ℃.Eelsegamislahus on optimeeritud tavapärase PCR jaoks ja kasutamiseks valmis, lisades DNA matriitsi ja praimereid.PCR-produkte saab elektroforeesiks laadida otse eellaaditud bromofenoolsinisega.Amplifitseeritud produktid sisaldavad 3'-dA eendit ja neid saab kergesti kloonida T-vektorisse.2×PCR Master Mix lihtsustab PCR protseduuri ja vähendab saastumist.
Säilitamistingimused
Tooteid tuleb hoida temperatuuril -25 ℃ ~ -15 ℃ 2 aastat.
Tehnilised andmed
Truudus (vs. Taq) | 1× |
Kuum algus | No |
Üleulatuvus | 3'-A |
Polümeraas | Taq DNA polümeraas |
Reaktsioonivorming | SuperMix või Master Mix |
Reaktsiooni kiirus | Standard |
Toote tüüp | PCR Master Mix (2x) |
Juhised
1.Reaktsioonisüsteem
Komponendid | Helitugevus(μL) |
Malli DNA | Sobivad |
Praimer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Praimer 2 (10 μmol/l) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | kuni 50 |
2.Võimendusprotokoll
Tsükli sammud | Temperatuur (°C) | Aeg | Tsüklid |
Esialgne denaturatsioon | 94 | 5 min | 1 |
Denatureerimine | 94 | 30 sek | 35 |
Lõõmutamine | 50-60 | 30 sek | |
Laiendus | 72 | 30-60 sek/kb | |
Lõplik pikendus | 72 | 10 min | 1 |
Märge:
1) Mallide kasutamine: 50-200 ng genoomne DNA;0,1-10 ng plasmiidset DNA-d.
2) Mg2+kontsentratsioon: see toode sisaldab 3 mM MgCl2, mis sobib enamiku PCR reaktsioonide jaoks.
3) Lõõmutustemperatuur: vaadake praimerite teoreetilist Tm väärtust.Lõõmutamistemperatuuri saab seada 2-5 ℃ madalamale kui praimeri teoreetiline väärtus.
4) Pikendusaeg: molekulaarseks tuvastamiseks on soovitatav 30 sek/kb.Geenide kloonimiseks on soovitatav kiirus 60 sek/kb.
Märkmed
1.2× PCR Master Mix'iga PCR-tooted ei sobi polüakrüülamiidgeelelektroforeesiks.
2.Oma ohutuse ja tervise huvides kandke töötamiseks laborikitlit ja ühekordseid kindaid.
3.Seda kasutatakse AINULT teadusuuringuteks!